Técnica de edición de Ácidos Nucleicos para la Leucemia Mieloide Aguda (LMA)

Tipo de edición	In vivo en células somáticas hematopoyéticas
Dirigidas hacia:	La enzima descafeinación del ARNm (DCPS) que es esencial para la supervivencia celular de la LMA.
Dirigidas por:	Endonucleasas guiadas por ARN, como CRISPR-Cas9 y por el inhibidor de DCPS RG3039.
Uso de vectores:	Vector de expresión pUC57-sgRNA.
Órgano o célula a tratar:	Células madre hematopoyéticas de la médula ósea.
Vía de administración:	Parenteral: Ratones NSG fueron inyectados con inhibidor de DCPS RG3039 intraperitoneal.
Resultados:	Corto plazo: El tratamiento de las células LMA con el inhibidor de DCPS RG3039 induce la detención del ciclo celular, la apoptosis y la diferenciación. Medio plazo: RG3039 Inhibe la actividad catalítica de DCPS mediante la unión a un sitio dentro de la secuencia HIT, interfiriendo con la unión DCPS a la 7-metilguanosina (tapa del ARNm) mejorando significativamente los síntomas y la supervivencia en los modelos de ratón con LMA. Largo plazo: al administrar el inhibidor de DCPS RG3039 intraperitoneal se generaron curvas de supervivencia en casos con LMA.

Referencia: 

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5849534/

Ejemplo de terapia con Stem Cells en la leucemia mieloide aguda (LMA)

Tipo de Stem Cells: células madre hematopoyéticas alogénicas (alo-SCT) a partir de la médula ósea.

Método de obtención: aspiración de médula de la cresta ilíaca posterior del donante.

Vía de administración: infusión de células madre mediante un catéter central.

Resultados

• Corto plazo: las nuevas células madre hematopoyéticas ingresan al cuerpo, se alojan en la médula ósea y se someten a una maduración in vivo.
• Mediano plazo: una vez que se destruyó toda la médula ósea dañada por medio de quimioterapia o radioterapia, comienzan a crecer nuevas células madre renovando la médula ósea.
• Largo plazo: los trasplantes alogénicos de células madre hematopoyéticas incrementan las posibilidades de curación disminuyendo el riesgo de recaída.

Referencias:

 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6972492/

Ejemplo de transgénico animal para la Leucemia Mieloide Aguda (LMA)

 Tema: Modelos murinos de leucemia mieloide aguda

Tipo de animal transgénico: Ratones transgénicos (ratones knock-in Mll-AF9/ ratones knockout Runx1 - / -)

Método: Microinyección directa pronuclear. 

Uso: esta estrategia sirve para establecer modelos transgénicos para PML-RARAgen de fusión resultante de la translocación cromosómica t (15; 17) (q24; q21) presente en la gran mayoría de pacientes con leucemia mieloide aguda (LMA). (1)

VENTAJAS DE LOS TRANSGÉNICOS

• Puede conseguirse alimentos más nutritivos e incluso se podrían usar como medicamentos o vacunas, insertando los genes necesarios.
• Alimentos con características más deseables, que produzcan menos sustancias cancerígenas al freírlas.
• Con fines terapéuticos la modificación genética de animales se utiliza para avanzar en el tratamiento de enfermedades o generar medicamentos.
• Los animales transgénicos se puede utilizar para xenotransplantes.
• Los animales transgénicos también pueden utilizarse como bioreactores. (2)

DESVENTAJAS DE LOS TRANSGÉNICOS

• El principal riesgo es la posibilidad inesperada de transferir enfermedades de los animales a los consumidores.
• Los animales transgénicos son víctimas de un mayor sufrimiento o estrés. 
• Incremento de sustancias tóxicas en el ambiente.
• Al modificar especies ya existentes podemos poner en riesgo especies autóctonas.
• El lugar donde se coloca el nuevo gen en el genoma puede ser indeterminado en algunos casos, entonces los resultados esperados pueden ser erróneos. (2)

REFERENCIAS: 

1. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6358780/.

2. https://www.agroempresario.com.ar/notas-9472.html#:~:text=Las%20desventajas%20de%20los%20animales,en%20el%20genoma%20puede%20ser 

Ejemplo de ADN recombinante artificial en la LMA y un ejemplo de recombinación de ácidos nucleicos en la naturaleza

 ADN recombinante artificial en la LMA

T: Investigación experimental de ARN circular hsa_circ_0000254 en leucemia mieloide aguda

O: Clonar el ARN circular hsa_circ_0000254 y construir su vector de sobreexpresión lentiviral.

G: hsa_circ_0000254 (un total de 524 pb de longitud).

ER: EcoR I y BamH I

EL: No menciona

V: pLCDH-circ254 (C254). 

CR: células 293T

MTG: Transfección por Lipofección. 

MIC: PCR, mapeo de restricción y de secuenciación. (1)

Ejemplo de recombinación de ácidos nucleicos en la naturaleza

El ADN recombinante en la naturaleza se presenta de manera natural, mediante diferentes procesos como la infección viral, reproducción sexual y la transformación bacteriana. Un claro ejemplo es la conjugación bacteriana que consiste en la transferencia de información genética desde una célula donadora a otra receptora, promovido por determinados tipos de plásmidos, y que requiere contactos directos entre ambas,  intervienen estructuras superficiales especializadas (pilus sexuales) y de funciones específicas. (2)

REFERENCIAS

1. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29950198/ 

2.https://www.cicy.mx/Documentos/CICY/Desde_Herbario/2018/2018-11-01-Baas-Tras-la-pista-de-los-replicadores.pdf